产品详情
a549-ddp细胞
- 产品名称：a549-ddp细胞
- 产品型号：a549-ddp
- 产品厂商：乾思中心
- 产品文档：
你添加了1件商品 查看购物车
简单介绍
a549-ddp细胞
a549-ddp细胞
的详细介绍人非小细胞肺癌细胞耐药亚株
(A549-DDP)
细胞介绍
这株细胞是用药物剂量增选法筛选获得的A549细胞耐药亚株。。
细胞特性
1)来源：肺癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
运输和保存：使用含有上等胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。收到细胞后，
可在1000RPM，常温条件下，离心5min后，于洁净操作台弃去上清，加入推荐
使用的培养基后转移至l〇cm培养皿或者T25培养瓶中培养，传代达到细胞生长
状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途：仅供科研使用。
细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
注意：客户收到细胞后按照下面的要求操作：培养瓶里面的培养液是不含药物
的。待细胞长到70-80%的汇合度时，去掉培养液，加入含500ng/mlDDP药物
的培养液，放入培养箱，这段时间肯定会有小部分细胞悬浮起来，但是不要紧，
通过换液可以去掉，下面的细胞待长满就可以消化传瓶了，这时可以一直用含
药培养液来消化培养细胞，一两代之后可以将药物浓度提髙到800ng/ml，含药
培养液用于细胞培养都没问题的，冻存的时候就不要在冻存液里面加药物了。
1.准备 1640 培养基(RPIVM-1640:GIBCO,货号 21875-091)，90%;北美胎牛血清，
10%，添加 800ng/mlDDP。
2. 培养条件：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱
湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻，加
入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补
加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将
细胞悬液加入l〇cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。**天换液并检
查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
力口 2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于37°C培
养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部
分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止
消化。
按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分
钟，弃去上清液，补加l-2mL培养液后吹匀。
将细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃
去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约lml含血清的培养基后
加入冻存管中，再添加1〇%DMSO后进行冻存。
注意事项：
收到细胞后，若发现干冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立
即与我们联系。
所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物**台内操作，并请注
意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。