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mda-mb-231细胞

  • 产品名称:mda-mb-231细胞
  • 产品型号:mda-mb-231
  • 产品厂商:乾思中心
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简单介绍
mda-mb-231细胞

mda-mb-231细胞

的详细介绍

 人乳腺癌细胞

(MDA-MB-231)
细胞介绍
MDA-MB-231是从一名51岁的白人女性乳腺癌患者的胸水中分离建立的。该细 胞表达表皮生长因子EGF受体、TGF- a受体和WNT7B癌基因。
细胞特性
1)来源:乳腺癌
2)形态:上皮细胞样
3)含量:>lxl06 个/mL
4)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格:T25瓶或者lmL冻存管包装
运输和保存:使用T25瓶充液发送活细胞。收到细胞后,请先在显微镜下检查细 胞生长状态,并将T25瓶置于培养箱约6h或过夜后,再次检查细胞状态。若状 态良好,可按照以下细胞培养步骤进行细胞后续处理操作。若发现可疑污染物, 请及时与我们取得联系。
细胞用途:仅供科研使用。
 
细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备:
1.准备 DMEM-H 培养基(DMEM-H,GIBCO,货号 12800017,添加 NaHC031.5g/L), 90%;胎牛血清,10%。(DMEM 液体培养基:GIBCO,11995-065)。
2.培养条件:37摄氏度气相:空气,100%。
3. 冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
2)细胞处理:
复苏细胞:将含有lmL细胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻,加 入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补 加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将 细胞悬液加入l〇cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。**天换液并检 查细胞密度。
细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
力口 2m丨消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中,置于37°C培
养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部 分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止 消化。
按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分 钟,弃去上清液,补加l-2mL培养液后吹匀。
将细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者 瓶中。
细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃 去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约lml含血清的培养基后 加入冻存管中,再添加1〇%DMSO后进行冻存。
 
注意事项:
收到细胞后,若发现干冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染, 请立即与我们联系。
所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物**台内操作, 并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
 
 
 
 
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