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hct-8-fu细胞

  • 产品名称:hct-8-fu细胞
  • 产品型号:hct-8-fu
  • 产品厂商:上海佰晔生物科技中心
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简单介绍
hct-8-fu细胞

hct-8-fu细胞

的详细介绍

 人结肠癌氟尿嚼陡耐药株 (HCT-8/FU)

细胞介绍
这是一株耐药细胞株。
细胞特性
1)来源:人结肠癌
2)形态:上皮细胞样
3)含量:>lxl06 个/mL
4)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格:T25瓶或者lmL冻存管包装
 
细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备:
注意:客户收到细胞后按照下面的要求操作:培养瓶里面的培养液是不含药物 的。待细胞长到70-80%的汇合度时,去掉培养液,加入含8000ng/mlFU药物 的培养液,放入培养箱,这段时间肯定会有小部分细胞悬浮起来,但是不要紧, 通过换液可以去掉,下面的细胞待长满就可以消化传瓶了,这时可以一直用含 药培养液来消化培养细胞,一两代之后可以将药物浓度提髙到15000ng/ml,含 药培养液用于细胞培养都没问题的,冻存的时候就不要在冻存液里面加药物了。
1.准备 RPIVM-1640 培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号 31800022,添加 NaHC031.5g八, D-葡萄糖2.5g八,丙酮酸钠O.llg八),90%;上等胎牛血清,10%,添加1%双 抗,15000ng/ml氟尿喃啶。
2.培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度,培养箱 湿度为70%-80%。
3. 冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
2)细胞处理:
复苏细胞:将含有lmL细胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻,加 入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补 加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将 细胞悬液加入l〇cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检 查细胞密度。
细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
力口 2m丨消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中,置于37°C培
养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部 分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止 消化。
 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分 钟,弃去上清液,补加l-2mL培养液后吹匀。
将细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者 瓶中。
细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃 去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约lml含血清的培养基后 加入冻存管中,再添加1〇%DMSO后进行冻存。
 
注意事项:
收到细胞后,若发现干冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立 即与我们联系。
所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注 意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
运输和保存:可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:(1)干冰运输,收到后 立即转入液氮冻存或直接复苏;(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细 胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途:仅供科研使用。
 
 
 
 
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