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cho细胞

  • 产品名称:cho细胞
  • 产品型号:cho
  • 产品厂商:佰晔中心
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简单介绍
cho细胞

cho细胞

的详细介绍

 中国仓鼠卵巢细胞

(CHO)
注意事项:
1. 收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即
与我们联系。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物**台内操作,并请注意
防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
 
细胞介绍
1957 年从成年仓鼠的活组织切片中建立。
细胞特性
1  来源:仓鼠卵巢
2  形态 :成纤维细胞样
3  含量:>1x10 6 个/mL
4  污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5  规格:T25 瓶或者 1mL 冻存管包装
细胞接受后 的处理:
1)收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。
2)请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将 T25 瓶置于 37℃培养约
2-3h。
3)弃去 T25 瓶中的培养基,添加 6ml 本公司附带的完全培养基。
4)如果细胞长满(90%以上)请及时进行细胞传代,传代培养用 6ml 本公司附
带的完全培养基。
接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取
得联系。
细胞用途:仅供科研使用。
 
细胞培养步骤
一. 培养基 及 培养 冻存 条件准备:
1)DMEM 培养基(GIBCO,货号 12800017,添加 NaHCO3 1.5g/L),90%;上等胎
牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37 摄氏度,培养箱
湿度为 70%-80%。
3)冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二. 细胞 处理 :
1) 复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加
入 4mL 培养基混合均匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补
加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将
细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并
检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 2ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培
养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部
分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止
消化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4
分钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 到 1:5 的比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者
瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃
去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约 1ml 含血清的培养基后
加入冻存管中,再添加 10%DMSO 后进行冻存。
 
 
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