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dt40细胞

  • 产品名称:dt40细胞
  • 产品型号:dt40
  • 产品厂商:上海佰晔生物科技中心
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简单介绍
dt40细胞

dt40细胞

的详细介绍

 鸡**瘤细胞

(DT40)
细胞介绍
DT40是来自HylineSC鸡法氏囊**细胞株经鸟类白血病病毒诱导建株的。原始
**瘤用罗氏相关病毒l(RAV-l)感染出生1天的小鸡得到。法氏囊中生成的肿瘤
制成细胞悬液后通过静脉注射输入同基因型的受体小鸡。经过一次体内移植后,
建立了 DT40细胞株。这株细胞包含的前病毒基因整合在c-myc原癌基因的上游,
表达的c-myc RNA水平较高。它缺少一个正常c-myc基因,但含有两个拷贝ALV
去调控的myc基因。这株细胞保留了重排**球蛋白轻链基因(IgL)的能力。在
IgL位点,DT40包含一个重排和一个胚系同源基因。c-rel基因和v-rel癌基因在
DT40细胞株中都能诱导组织相容性(MHC)II类抗原表达。v-rel诱导的MHCII表达
比c-rel诱导快,且其有效性在数周后达到c-rel的50倍。这株细胞呈**母细胞
表型。传染性检测表明DT40释放低水平的传染性RAV-1。这株细胞可以用于稳
转研究。
 
细胞特性
1)来源:鸡**瘤
2)形态:**母细胞
3)含量:>lxl06 个/mL
4)污染:支原体、**、酵母和**检测为阴性
5)规格:T25瓶或者lmL冻存管包装
运输和保存:使用含有上等胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。收到细胞后,
可在1000RPM,常温条件下,离心5min后,于洁净操作台弃去上清,加入推荐
使用的培养基后转移至l〇cm培养皿或者T25培养瓶中培养,传代达到细胞生长
状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途:仅供科研使用。
 
细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备:
1. 准备 DMEM 培养基(DMEM,GIBCO,货号 11965-092),85%;胎牛血清,10%,
鸡血清,5%。
2. 培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度,培养箱
湿度为70%-80%。
3.冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
2)细胞处理:
复苏细胞:将含有lmL细胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻,加
入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补
 
加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将
细胞悬液加入l〇cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检
查细胞密度。
细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加l-2mL
培养液后吹匀,将细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培养基的
新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细
胞悬液按1: 2到1: 3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时,应
将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸
走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO
后进行冻存。
 
注意事项:
收到细胞后,若发现干冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立
即与我们联系。
所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注
意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要**后方能丢弃。
 
 
 
 
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