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lec1细胞

  • 产品名称:lec1细胞
  • 产品型号:lec1
  • 产品厂商:上海佰晔生物科技中心
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简单介绍
lec1细胞

lec1细胞

的详细介绍

 仓鼠卵巢细胞

(lec1)
细胞介绍
Lecl (原先叫做Pro-5wgaRl 3C,ATCC)是从脯氨酸缺陷型的CHO克隆Pro-5中挑选
出来的能抗麦芽凝集素的突变株。Lecl缺乏称作GIcNAc-Tl的糖基转移酶,从而
N-连接碳水化合物被阻断在Man5GlcNAc2Asn中间体。对于研究N-连接糖基化改
变对内源糖蛋白或病毒感染、以克隆DNA转染产生的糖蛋白的功能和区隔化的
影响,这些细胞十分有用。
细胞特性
1)来源:仓鼠卵巢
2)形态:上皮细胞样
3)含量:>lxl06 个/mL
4)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格:T25瓶或者lmL冻存管包装
 
运输和保存:使用含有上等胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。收到细胞后,
可在1000RPM,常温条件下,离心5min后,于洁净操作台弃去上清,加入推荐
使用的培养基后转移至l〇cm培养皿或者T25培养瓶中培养,传代达到细胞生长
状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途:仅供科研使用。
细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备:
1.准备ct-MEM 培养基(ct-MEM,GIBCO,货号 11900024,添加 NaHC031.5g八,
肌醇43.2mg八,叶酸8.82mg八,0-疏基乙醇7.8mg八),90%;上等胎牛血清,
10%。
2.培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度,培养箱
湿度为70%-80%。
3. 冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
2)细胞处理:
复苏细胞:将含有lmL细胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻,加
入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补
加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将
细胞悬液加入l〇cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检
查细胞密度。
细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
 
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
力口 2m丨消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中,置于37°C培
养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部
分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止
消化。
按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分
钟,弃去上清液,补加l-2mL培养液后吹匀。
将细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者
瓶中。
细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃
去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约lml含血清的培养基后
加入冻存管中,再添加1〇%DMSO后进行冻存。
注意事项:
收到细胞后,若发现干冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立
即与我们联系。
所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注
意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
 
 
 
 
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