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huvec细胞

  • 产品名称:huvec细胞
  • 产品型号:huvec
  • 产品厂商:上海佰晔生物科技中心
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简单介绍
huvec细胞

huvec细胞

的详细介绍

 人静脉内皮细胞 (HUV-EC)

细胞介绍
该细胞来源于人静脉内皮,可在半固体培养基中形成克隆,在免疫抑制小鼠中不 能形成肿瘤。
细胞特性
1)来源:人静脉内皮
2)形态:内皮细胞
3)含量:>lxl06 个/mL
4)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格:T25瓶或者lmL冻存管包装
运输和保存:可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:(1)干冰运输,收到后 立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;(2)存活细胞,收到后应继续生 长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。 收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。
细胞用途:仅供科研使用。
细胞接收后的处理:
1.收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。
2.请先在显微镜下确认细胞生长状态,酒精消毒瓶壁并将T25瓶置于37°C培养 约 2-3h。
3.弃去T25瓶中的培养基,添加6ml本公司附带的完全培养基。
4.如果细胞长满80%-90%请及时进行细胞传代,传代培养用本公司附带的完全
培养基。
 
细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备:
1.准备 F-12K 培养基(F-12K:SIGMA,货号 N3520,添加 0.1 mg/ml 肝素;0.03-0.05 mg/ml内皮细胞生长因子),90%;上等胎牛血清,10%。
2.培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度,培养箱 湿度为70%-80%。
3.冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
2)细胞处理:
复苏细胞:将含有lmL细胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻,加 入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补 加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将
 细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检 查细胞密度。
细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
力口 2m丨消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中,置于37°C培
养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部 分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止 消化。
按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分 钟,弃去上清液,补加l-2mL培养液后吹匀。
 将细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者 瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。
下面T25瓶为例;
细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入lml胰酶,细 胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
lOOOrpm离心分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至*终浓度为10%。 加入DMSO后迅速混匀,按每lml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做 好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液 氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
 
注意事项:
收到细胞后,若发现干冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立 即与我们联系。
所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注 意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
 
 
 
 
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