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sra0104细胞

  • 产品名称:sra0104细胞
  • 产品型号:sra0104
  • 产品厂商:上海佰晔生物科技中心
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简单介绍
sra0104细胞

sra0104细胞

的详细介绍

人晶体上皮细胞永生系(SRA01/04) 

细胞培养步骤

1)培养基及培养冻存条件准备:
1.准备 RPIVM-1640 培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号 21875-091);北美胎牛血清,
10% ; PS1%。
2.培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度,培养箱
湿度为70%-80%。
3.冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
2)细胞处理:
1.复苏细胞:将含有lmL细胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻,加
入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补
加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将
细胞悬液加入l〇cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检
查细胞密度。
2.细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
力口 2m丨消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中,置于37°C培
养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部
分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2ml完全培养基
终止消化。
按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分
钟,弃去上清液,补加l-2mL培养液后吹匀。
人晶体上皮细胞永生系
(SRA01/04)
3.细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。

细胞特性

1)来源:晶状体
2)形态:上皮细胞样
3)含量:>lxl06 个/mL
4)污染:支原体、**、酵母和**检测为阴性
5)规格:T25瓶或者lmL冻存管包装
运输和保存:使用含有上等胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。收到细胞后,
可在1000RPM,常温条件下,离心5min后,于洁净操作台弃去上清,加入推荐
使用的培养基后转移至l〇cm培养皿或者T25培养瓶中培养,传代达到细胞生长
状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途:仅供科研使用。
 
下面T25瓶为例;
细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入lml胰酶,细
胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
lOOOrpm离心4分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至*终浓度为
10%。加入DMSO后迅速混匀,按每lml的数量分配到冻存管中,注意冻存
管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液
氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
注意事项:
收到细胞后,若发现干冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立
即与我们联系。
所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注
意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要**后方能丢弃。
 
 
 
 
 
 
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