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mrc-5细胞

  • 产品名称:mrc-5细胞
  • 产品型号:mrc-5
  • 产品厂商:上海佰晔生物科技中心
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简单介绍
mrc-5细胞

mrc-5细胞

的详细介绍

人胚肺细胞 (MRC-5)

细胞介绍

MRC-5细胞系来自14周龄男性胎儿的正常肺组织,该细胞老化前能传代42到 46次群体倍增。它是正常二倍体细胞系,46, XY核型。模式染色体数为46,概 率为70%。

细胞特性

1)来源:肺

2)形态:成纤维细胞

3)含量:>lxl06 个/mL

4)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5)规格:T25瓶或者lmL冻存管包装

运输和保存:可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:(1)干冰运输,收到后 立即转入液氮冻存或直接复苏;(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细 胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

细胞用途:仅供科研使用。

 

细胞培养步骤

1)培养基及培养冻存条件准备:

1.准备 MEM 培养基(MEM:GIBCO,货号 11095-080),北美胎牛血清(United States, GIBCO,货号 16000-044),15%,1% PS。

2. 培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度,培养箱 湿度为70%-80%。

3.冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。液氮储存。

2)细胞处理:

复苏细胞:将含有lmL细胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻,加 入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补 加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将 细胞悬液加入l〇cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检 查细胞密度。

细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

力口 2m丨消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中,置于37°C培

养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部 分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分 钟,弃去上清液,补加l-2mL培养液后吹匀。

 将细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者 瓶中。

细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,先 要消化处理并进行细胞计数。消化方法按照细胞传代方法的1-3步骤进行, *后的重悬液使用血清。悬浮细胞直接计数后离心,用血清重悬浮,加DMSO 至*终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每lml的数量分配到冻存管 中。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。

收到细胞后,若发现干冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立 即与我们联系。

所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注 意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

 

注意事项:

收到细胞后,若发现干冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立 即与我们联系。

所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注 意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

 

 

 

 

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