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nk-92细胞

  • 产品名称:nk-92细胞
  • 产品型号:nk-92
  • 产品厂商:上海佰晔生物科技中心
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简单介绍
nk-92细胞

nk-92细胞

的详细介绍

 人恶性非霍奇金**瘤患者

的自然杀伤细胞 (NK-92)
细胞介绍
NK-92是从一位患有急进性非霍奇金**瘤的50岁白人男性外周血单核细胞衍 生来的一株白细胞介素-2依赖型NK细胞株。这株细胞对很多恶性细胞有细胞毒 性;铬释放试验显示它能杀死K562和Daudi细胞。NK-92细胞(经过照射以防止 增殖)可以有效地用于血液中白血病的体外**清扫而不危及血细胞的功能。 NK-92细胞有以下特征:CD2, CD7, CDlla, CD28, CD45, CD54表面标记阳性,CD56 亮;CD1, CD3, CD4, CD5, CD8, CD10, CD14, CD16, CD19, CD20, CD23, CD34 和 HLA-DR 表面标记阴性。
细胞特性
1)来源:恶性非霍奇金**瘤患者的自然杀伤细胞
2)形态:**母细胞
3)含量:>lxl06 个/mL
4)污染:支原体、**、酵母和**检测为阴性
5)规格:T25瓶或者lmL冻存管包装
运输和保存:使用含有上等胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。收到细胞后, 可在1000RPM,常温条件下,离心5min后,于洁净操作台弃去上清,加入推荐 使用的培养基后转移至l〇cm培养皿或者T25培养瓶中培养,传代达到细胞生长 状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途:仅供科研使用。
 
细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备:
1.准备 RPIVM-1640 培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号 21875-091),75%;添加 0.2mM 肌醇,O.lmM 0-Me,0.02mM叶酸,100UIL-2,马血清12.5%,北美胎牛血 清,12_5%。
2. 培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度,培养箱 湿度为70%-80%。
3.冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
2)细胞处理:
复苏细胞:将含有lmL细胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻,加 入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补 加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将
细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检 查细胞密度。
细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加l-2mL 培养液后吹匀,将细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培养基的 新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细 胞悬液按1: 2到1: 3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞直接计数后 离心,用血清重悬浮,加DMSO至*终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀, 按每lml的数量分配到冻存管中。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106 个细胞冻存。
 
注意事项:
收到细胞后,若发现干冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立 即与我们联系。
所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注 意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要**后方能丢弃。
 
 
 
 
 
 
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